PBS 1X
¡Hola estudiantes! En el laboratorio, uno de los productos que seguramente encontrarán es el PBS 1X. Ésta es una «solución salina tamponada con fosfato» (PBS de las siglas en inglés) que se usa para diluir y preparar muestras biológicas, en una solución isotónica y fisiológica, donde el 1X indica la concentración óptima de la solución. Acá te dejo algunos usos del PBS en investigación y en clínica:
- Dilución y preparación de muestras biológicas.
- Mantenimiento de la integridad y actividad biológica de células y proteínas.
- Experimentos de microscopía y citometría de flujo.
- Purificación de proteínas.
- Tampón en experimentos bioquímicos.
- Detección de proteínas y ácidos nucleicos.
- Estabilización de anticuerpos y preparación de soluciones de anticuerpos para inmunotinción e inmunofluorescencia.
- y protección de su degradación durante el almacenamiento.
- Incubación de células, tanto para la adherencia como para la suspensión.
- Lavado y fijación de células y tejidos, en varias técnicas.
- Análisis de muestras de sangre y otros fluidos biológicos.
¡Así que es una solución muy versátil e importante en el laboratorio!
En resumen, esta solución es esencial en el laboratorio para una variedad de aplicaciones que involucran muestras biológicas, desde la investigación básica hasta la clínica. Acá abajo tienes el protocolo de como preparar PBS 1X.
Protocolo de preparación de PBS 1X (1L)
Aquí te presento los pasos para preparar una solución de PBS 1X a partir de una solución de PBS 10X. Es importante seguir los pasos con cuidado y utilizar materiales y técnicas estériles para evitar la contaminación de la solución.
Necesitarás:
- PBS 10X
- Agua destilada o desionizada o Milli-Q
- Matraz aforado (volumétrico)
- Vaso de precipitados de 1L
- Probeta de 1L y probeta de 100mL
- Schott (botella de tapa azul) de 1L
- Varilla magnética de agitación (caña)
- pHímetro
- Agitador magnético
- Barra magnética (pececillo)
- Etiqueta
A continuación, te explico los pasos a seguir:
- Coloca una etiqueta en el Schott con el nombre de PBS 1X, para que después pueda ser almacenado ahí.
- Agrega 100mL de PBS 10X (¿Cómo se prepara PBS 10X?) al vaso de precipitados. Puedes medirlo con una probeta de 100mL.
- Coloca el recipiente en un agitador magnético y agrega una barra magnética, procura mezclar bien.
- Utiliza un pHímetro para medir el pH de la solución y ajusta si es necesario a un pH de 7.4 con ácido clorhídrico (HCl) o hidróxido de sodio (NaOH). Haz esto en agitación constante en el agitador magnético, pero ten cuidado con la sonda del pHímetro, que es muy delicada.
- Retira la barra magnética de la solución con la caña.
- Afora hasta 1000mL (1L) con agua destilada, desionizada o Milli-Q en una probeta de 1L o en un matraz aforado.
- Coloca la solución en un Schott de 1L.
- Guarda el Schott etiquetado como PBS 1X hasta su uso. Agita bien antes de utilizar.
Recuerda siempre verificar la calidad de los reactivos y materiales utilizados para garantizar la eficacia y precisión de tus experimentos. ¡Mucho éxito!